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產品簡介
產品名稱 ： 大鼠腸神經嵴干細胞
產品品牌 ： 通蔚生物
組織來源 ： 腸組織
產品規格 ： 5×105cells/T 25細胞培養瓶
細胞簡介
大鼠腸神經嵴干細胞分離自腸組織；神經嵴干細胞(neuralcrest stem cells，N C SC )，即外周神經系統干細胞，起源于胚胎期的神經管背側，與中樞神經系統干細胞在形態學上有著顯著不同，N C SC 可表達低親和力神經營養因子受體p75N T R 而不能分化出少突膠質細胞，而中樞神經系統干細胞與之恰好相反。
N C SC 可在不同部位分化出多種組織，如神經元、神經膠質、黑色素細胞、內分泌細胞、平滑肌、骨骼肌及骨等，其中可特異性分化出腸神經系統中神經元和神經膠質的N C SC ，被稱為腸神經嵴干細胞(gutneuralcrest stemcells，G N CSC)。
方法簡介
通蔚生物實驗室分離的大鼠腸神經嵴干細胞采用中性蛋白酶-膠原酶聯合消化法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶 。
質量檢測
通蔚生物實驗室分離的大鼠腸神經嵴干細胞經N estin免疫熒光鑒定，純度可達90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
培 養 基 ： 含B-27 Supplem ent、EG F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 懸浮
細胞形態 ： 球形
傳代特性 ： 可傳1-3代左右；3代以內狀態最佳
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培養條件 ： 氣相：空氣，95% ；C O2，5%
大鼠腸神經嵴干細胞體外培養周期有限；建議使用通蔚生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。
細胞培養狀態
發貨時發送細胞電子版照片
使用方法
大鼠腸神經嵴干細胞是一種懸浮細胞，細胞形態呈球形，在通蔚生物技術部標準操作流程下，細胞可傳1-3代左右；3代以內狀態最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1.取出T 25細胞培養瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2.懸浮細胞處理
1) 收集T25細胞培養瓶中的培養基至50ml離心管中，用PBS清洗細胞培養瓶1-2次，收集清洗液。
2) 1200-1500rpm 離心3min，棄上清，收集細胞沉淀。
3) 加入5ml新鮮完全培養基，用吸管輕輕吹打混勻、分散細胞；將分散好的細胞調整合適
密度接種至培養器皿中，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 若遇到懸浮細胞團塊較大，無法機械吹散時，向步驟2)中細胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至離心管中，用吸-管輕輕吹打混勻，37℃溫浴2-3min，消化結束后，加入胰酶抑制劑(或血清)終止消化，用吸管輕輕吹打，分散細胞；1200rpm 離心5min，棄上清，收集細胞沉淀。
5) 加入5ml新鮮完全培養基，用吸管輕輕吹打混勻；按傳代比例進行接種傳代，然后補充
新鮮的完全培養基至5m L，置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
6) 待細胞狀態穩定后，培養觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和通蔚生物技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
