樣品保存
樣品收集后若在 1 周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融,標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
洗滌液/稀釋液配置
標準品配置
試劑盒中取出標準品,準備7個試管,先從40ng/mL標準品(200μL)按需吸取一定量用1×稀釋液稀釋至2000pg/mL(例:50μL的標準品母液+950μL的1×稀釋液,制備得到1000μL的2000pg/mL濃度標準品),隨后在6個試管中分別加入500μL的1×稀釋液,在這6個單獨的試管中將2000pg/mL標準品依次2倍倍比稀釋至6個梯度,共配制7個濃度的標準品,依次為: 2000pg/mL、 1000pg/mL、 500pg/mL、 250pg/mL、 125pg/mL、 62.5pg/mL、 31.25pg/mL,從最高濃度標準品溶液中吸取500μL標準品到下一個試管中,輕輕吹打混勻,以此類推進行標準品的倍比稀釋(如圖所示),1×稀釋液用作零濃度標準品(0pg/mL)。
	
 
	
抗體工作液配置
使用前10分鐘,將100×生物素化抗體于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×生物素化抗體稀釋成1×生物素化抗體工作液,根據所需用量當日配置當日使用。使用前10分鐘,將100×SA-HRP溶液于1000×g離心1分鐘,隨后用1×稀釋液將100×SA-HRP稀釋成1×SA-HRP工作液,根據所需用量配置。
	
 
以下數據和曲線僅供參考,實驗者需根據自己的實驗數據建立標準曲線。
	 
	 
						標準品濃度(pg/mL) 
					 
						2000 
					 
						1000 
					 
						500 
					 
						250 
					 
						125 
					 
						62.5 
					 
						31.25 
					 
						0 
					 
						OD值 
					 
						2.478 
					 
						1.611 
					 
						0.914 
					 
						0.653 
					 
						0.444 
					 
						0.292 
					 
						0.172 
					 
						0.051 
					 
						校正OD值 
					 
						2.427 
					 
						1.56 
					 
						0.863 
					 
						0.602 
					 
						0.393 
					 
						0.241 
					 
						0.121 
					 
						0 
					
		
			
				 
			
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
			
				 
			
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
			
				 
		
	
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
				
					 
			
下圖所示標準曲線僅供示例,結果計算應以同次試驗標準品所繪標準曲線為準計算樣本結果 
	
 
	
 
	
 
重復性
靈敏度
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