發布時間:2021-06-11 發布作者:上海通蔚生物
	ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎,ELISA試劑以及各種溶液如何配置?最近剛做了下ELISA實驗,把各種ELISA配置方法匯總如下:
 1、ELISA實驗包被緩沖液
 2、ELISA實驗洗滌緩沖液
 3、ELISA實驗稀釋液
 4、ELISA實驗終止液
 5、ELISA底物緩沖液
 6、ELISA實驗TMB四甲基聯苯胺、使用液
 7、ELISA實驗ABTS使用液
 8、ELISC
	
	試劑
 1、ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
 NaHCO3 1.59g
 NaHCO3	2.93g
 加蒸餾水至 1000ml
	
	2、ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
 KH2PO4 0.2g
 Na2HPO4·12H2O 2.9g
 NaCl 8g
 KCl	0.2g
 Tween-20 0.05%	0.5ml
 加蒸餾水至 1000ml
	
	3、ELISA實驗稀釋液:
 牛血清白蛋白(BSA) 0.1g
 加洗滌緩沖液至 100ml
 或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
	
	4、ELISA實驗終止液(2M H2SO4):
 蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸98%、 21.7ml。
	
	5、ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):
 0.2M Na2HPO4(28.4g/L) 25.7ml
 0.1M 檸檬酸(19.2g/L)	24.3ml
 加蒸餾水50ml
	
6、ELISA實驗TMB(四甲基聯苯胺)使用液:
	TMB(10mg/5ml無水乙醇)	0.5ml
 底物緩沖液(PH5.5)	10ml
 0.75%H2O2 32μl
	
	7、ELISA實驗ABTS使用液:
 ABTS	0.5mg
 底物緩沖液(PH5.5)	1ml
 3%H2O2	2μl
	
	8、ELISA實驗封閉液:
 牛血清白蛋白(BSA) 5g
 加洗滌緩沖液至 100ml
 值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。
	
為了保證ELISA實驗的準確性,實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要精確,將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔,嚴防交叉污染。